El bioplaguicida más famoso: Bacillus thuringiensis
Bacillus thuringiensis es una bacteria del tipo gram-positiva cuyo hábitat es el suelo, esta tiene la capacidad de producir muchas proteínas con características mata insectos, estas se quedan almacenadas en la parte de la célula llamada citoplasma formando así inclusiones en forma de cristal. Estas inclusiones tienen efectos letales para algunos insectos que transmiten enfermedades provenientes de las áreas tropicales y plagas que afectan las cosechas. La actividad entomocida que producen las secreciones de esta bacteria a través de esporas y cristales, se ha aprovechado para la creación de plaguicidas biológicos, de esta forma el empleo de esta cualidad ha hecho de Bt un instrumento muy útil en el área de la biotecnología médica.
La transformación de las características externas o físicas de la bacteria B. subtilis, así como la regulación de expresión genética o mantenimiento estable de genes se ha llevado a cabo a través de la integración cromosomal del ADN plasmídico. Para expresar un gen de una inclusión de proteína cristalífera de B. thuringiensis en B. subtilis se ha empleado un agente de integración. Pero existe un problema debido a que un aspecto clave para crear pesticidas a partir de Bt, es decir la manipulación genética, es complejo en el aspecto experimental. Esto se debe a que Bt se resiste a transformarse, aún usando la técnica de electroporación, la cual resulta tener muy buen efecto. Para Bt las transformaciones disponibles en la literatura presentan un bajo índice de efectividad, de máximo 10^4 transformantes μg-1, incluso existen reportes que las señalan como inviables.
Las únicas técnicas mediante las cuales se han logrado desarrollar cepas recombinantes de Bt es la mutagénesis, secuencias de inserción, y el uso de plásmidos que son sensibles a la temperatura en el proceso de replicación, puesto que a diferencia de B. subtilis en la cual es mucho más fácil lograr una recombinación general (también llamada homóloga), en Bt es muy complicado y representa un gran inconveniente.
